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感染非瘟后存活的豬不會長期帶毒！4個月后復(fù)養(yǎng)最穩(wěn)妥

發(fā)布時間：

2019-07-11

　　作者：A. Petrov | J. H. Forth | L. Zani | M. Beer | S. Blome
　　編譯：豬譯館蔚飛
　　作者均是來自德國因塞爾里姆斯弗里德里希-洛弗勒研究所診斷病毒學(xué)研究室和傳染病研究室的研究人員
　　本文整理了來自德國因塞爾里姆斯弗里德里希-洛弗勒研究所的一份針對豬ASFV（非洲豬瘟）帶毒狀態(tài)的研究報告，實驗用了36頭豬，歷時165天，得到了一個明確的結(jié)果：陰性哨兵豬與實驗感染豬在感染后99天混欄沒有轉(zhuǎn)陽，實驗感染存活的豬組織中也沒有分離到病毒，表明存活下來的感染豬并不會長期帶毒，而是隨著時間的推移，病毒載量逐漸降低，并最后完全清除病毒。這一結(jié)果也與之前的幾項研究結(jié)果一致。
　　總體來說，沒有看到任何感染中等毒力的ASFV后仍然存活的豬存在帶毒狀態(tài)。血液中病毒基因組的長期可檢測性不僅是一個風(fēng)險，也是一個診斷的機會。在至少90天內(nèi)，PCR將能夠在受感染的豬身上檢測出病毒。
　　這項研究采用實驗使用被認為是I型的中等毒力的ASFV分離株（荷蘭86株）作為模型病毒，用36頭豬，30頭豬為實驗感染豬（C豬），6頭豬為陰性哨兵豬（S豬）。本實驗在C豬感染后的第164/165天結(jié)束。得到了一個明確的結(jié)果：實驗感染豬在感染后99天后，陰性哨兵豬與其混欄沒有轉(zhuǎn)陽，實驗感染存活的豬組織中也沒有分離到病毒，表明存活下來的感染豬并不會長期帶毒，而是隨著時間的推移，病毒載量逐漸降低，并最后完全清除病毒。
　　研究要點摘錄如下：
　　一、30頭5~6月齡健康雜交家豬，用2ml含有2×104 HAU的荷蘭86株ASFV的細胞培養(yǎng)上清液用滴鼻的方式進行感染。在感染后的32天內(nèi)，有10頭豬因ASFV死亡，1頭因中樞神經(jīng)紊亂進行安樂死（28天時），有19頭存活。
　　二、存活的19頭豬中，9頭在感染91天內(nèi)，ASFV特異性qPCR呈陰性，其余10頭在91天后， ASFV特異性qPCR才呈陰性。
　　三、所有接種的豬都出現(xiàn)了包括發(fā)燒在內(nèi)的臨床癥狀。大多數(shù)的豬，在接種后4-6天就首次出現(xiàn)臨床評分和體溫升高，最晚的是接種后24天。急性期平均每頭豬持續(xù)8-10天（4-19天不等），臨床評分最大值為7-14分。
　　四、在試驗過程中，在所有30感染豬的血液樣本中均發(fā)現(xiàn)了非洲豬瘟病毒基因組和活病毒。首批陽性結(jié)果在3-21天檢測到。從第3天開始，qPCR陽性豬的數(shù)量穩(wěn)步增加，直到29天時所有豬都出現(xiàn)陽性結(jié)果。
　　五、在10和14天時檢測到最高的基因組載量，最大Cq值為18-19。在第29天，Cq值下降了6，在接種ASFV第42 天時，6頭豬首次出現(xiàn)qPCR陰性結(jié)果，48天達到7頭，63天達到10頭。91 天后，52%的C豬qPCR結(jié)果仍為陽性，且基因組載量下降(cq28 - 30)。
　　六、血吸附試驗在血清中首次檢測到ASFV與全血的qPCR結(jié)果一致。隨后，血吸附試驗陽性樣本量迅速下降，直到從第63天開始所有存活的豬呈陰性。從血液中清除需要>90天（盡管從第63天開始就檢測不到活病毒了），因此，我們可以說病毒存留時間很長。鑒于ASFV被認為是安全地被包裹在紅細胞膜中（Bastos et al., 2003; Gallardo et al., 2009），這些結(jié)果可能與豬紅細胞的最大壽命是約65~85天有關(guān)（Liebich, 2003）。
　　七、在每只實驗感染的豬的各種拭子樣本中（包括：糞拭子、口咽淺表拭子、口咽拭子），均觀察到了不同程度的散毒情況。口咽樣本的陽性結(jié)果更多，基因組載量更高（最大Cq值28），并且在接種后第63天都還能監(jiān)測到陽性結(jié)果。到91天后所有樣本沒有檢測到陽性，可以猜測，91天后，才沒有散毒。
　　八、試驗期間，3頭C豬和1頭S豬因為非相關(guān)的原因被安樂死（接種28天時有1頭C豬，接種86天時有1頭C豬，128天時有1頭C豬，135天時有1頭S豬）。
　　九、在感染后的第99天，將存活的19頭C豬重新混群，并將6頭健康的S豬混入其中（每組2頭），這6頭S豬在暴露于C豬前也沒有ASFV和相關(guān)抗體。在暴露開始后的28天內(nèi)，用血吸附試驗和常規(guī)PCR 對這些豬進行四次臨床評估和采樣，分別為感染后的第105、112、119和126 天。隨后，實驗措施集中在臨床觀察和必要時的病理形態(tài)學(xué)研究。直到試驗結(jié)束時，即人工感染后第164天，所有健康的s豬和所有存活的C豬，均未檢測出非洲豬瘟病毒。其中包括1頭S豬的11個胎兒脾臟樣本。
　　十、也就是說，在感染第99天后，幸存的豬能完全控制和消滅病毒，不會再散毒。
　　十一、但是如果有蜱蟲出現(xiàn)的話，情況就有可能不同，這個試驗討論的不是通過肌肉注射/靜脈注射感染易感動物，所以，如果要想成功復(fù)養(yǎng)，還必須消滅蜱蟲。
　　十二、在風(fēng)險評估方面，必須考慮到最壞的情況。如果野豬死于其他原因，那么尸體就可能成為易感動物的一個感染源。在這種情況下，我們必須考慮經(jīng)口感染而不是非腸道途徑。
　　十三、由于試驗中最晚出現(xiàn)臨床癥狀的豬是在感染后24天，所以最穩(wěn)妥的做法可能是在觀察到臨床癥狀后的第115天，即4個月后，才考慮復(fù)養(yǎng)計劃，可能更為穩(wěn)妥。
　　來源：每日微豬