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豬繁殖與呼吸綜合征區(qū)域流行病學調查

發(fā)布時間:

2018-08-31

  豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的急性、高度接觸性傳染病。單股RNA病毒,屬于動脈炎病毒科,動脈炎病毒屬成員,分歐洲型和美洲型,我國流行的主要是美洲型。PRRS在20世紀80年代首發(fā)于美國,現(xiàn)已遍布世界主要養(yǎng)豬國家。我國1996年首次分離到病毒,證實有PRRS存在,隨后在不同地區(qū)迅速傳播、變異,2006年突然暴發(fā)嚴重的無名高熱病,經研究證實主要是由PRRSV的變異株HP PRRSV引起。
  PRRS主要臨床癥狀是妊娠母豬流產、死胎、木乃伊胎等繁殖障礙,各年齡段仔豬的呼吸道癥狀,以及哺乳仔豬的高死亡率,PRRS常與豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)等病原混合感染使病情復雜化,20世紀90年代以來PRRS感染呈上升趨勢,已嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。
  目前國內PRRS防控以疫苗免疫為主,大慶市近些年PRRS疫苗免疫密度幾乎達到100%,血清流行病學調查已不可能。為了解大慶市豬群PRRS感染情況,2017年,項目組在大慶市及周邊地區(qū)共采集疑似病豬場和屠宰場組織樣本251套,進行核酸調查,為區(qū)域防控措施的制定提供依據,為實驗室進一步研究提供原始材料。
  1  材料和方法
  1.1 材料
  待檢樣本采自7個疑似斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征發(fā)病豬場病死豬組織樣本11套(肝、脾、肺、扁桃體和淋巴結等),7家屠宰場組織樣本240套。
  1.2 方法
  1.2.1 合成引物
  根據GB/T18090-2008豬繁殖與呼吸綜合征診斷方法合成引物。
  上游引物P1:5'-GCGGATCCATGCCAAATAACAAC-3',下游引物P2:5'-AGCTCGAGTCATGCTGAGGGTGA-3'。
  1.2.2 操作過程
  根據GB/T 18090-2008方法處理樣品提取RNA模板,反轉錄,PCR擴增。反應條件為:95℃、5min,95℃、1min,51℃、1min,72℃、1min,35個循環(huán),72℃、延伸10min。被檢樣品出現(xiàn)372bp擴增帶判為陽性。
  2  檢測結果
  2.1 總體檢測結果
  本次共采集樣品251套,其中7個疑似豬場11套,7家屠宰場組織樣本240套,經基因擴增檢測,陽性組織樣本10套,平均陽性率3.98%,陽性次數(shù)5次,次平均陽性率23.81%。詳見表1。
  PRRS感染呈世界分布,近年來各種專業(yè)文獻報道顯示,我國豬群感染已較為普遍,本次調查,大慶市及周邊地區(qū)疑似病例樣品陽性批次為42.86%,樣品陽性率為45.45%,顯示大慶市及周邊地區(qū)豬群在疫病感染死亡病例中,由PRRS為主引起的病例較多,已接近一半。屠宰場樣品陽性批次為14.29%,樣品陽性率為2.08%,顯示有部分成年豬隱性帶毒。
  2.2 不同地區(qū)樣品檢測結果
  本次組織樣品按區(qū)域劃分為8個地區(qū),經統(tǒng)計,各地區(qū)差異較大,有4個地區(qū)未檢出,但檢出地區(qū)批次陽性率較高;地區(qū)樣品陽性率同樣差別較大,詳見表2。
  由表2可知,大慶市及周邊地區(qū)PRRS感染率不高,有些地區(qū)并未檢出陽性樣品,批次陽性率較高的地區(qū)有ZB和HG等,陽性率在50.00%左右,平均陽性率只有23.81%;樣品陽性率較高的地區(qū)只有ZB,其他地區(qū)較低,平均陽性率只有3.98%。
  3   討論
  豬繁殖與呼吸綜合征是目前危害我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要疫病之一,常與豬圓環(huán)病毒的病原混合或繼發(fā)感染,加重病情。目前我國各地主要生豬產區(qū)深受豬繁殖與呼吸綜合征影響。本次調查,對采自大慶市及周邊地區(qū)7個疑似豬場的11套樣品和7家屠宰場的240套樣品,進行了分子生物學(RT-PCR)檢測。結果顯示,PRRS陽性批次只有23.81%(5/21),樣品平均陽性率更少,僅為3.98%(10/251),與國內其他地區(qū)報道和以往認知不符,明顯偏低,這與樣品來源有關,本次樣品主要來源屠宰場。
  目前我國豬繁殖與呼吸綜合征防控是以疫苗免疫為主,前些年實行強制免疫,大慶市及周邊地區(qū)應用的是滅活疫苗,特別是大慶市,根據免疫抗體檢測效果,連續(xù)免疫,很好地控制了疫情。本次流行病學調查健康帶毒陽性豬群不高,與疫苗連續(xù)應用有直接關系,也說明現(xiàn)階段,疫苗應用的重要性。由于豬繁殖與呼吸綜合征是免疫抑制性疫病,在豬群繁殖與呼吸綜合征防控工作中,建立綜合性防控措施,控制混合感染和繼發(fā)感染,降低豬群潛在危害,有重要的指導意義。